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產品名稱：兔腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒

兔腫瘤浸潤組織白細胞分離液試劑盒【檢驗原理】

本分離液為 FICOLL、羥乙一基淀粉 550 與泛影酸葡甲胺的混合液。抗凝血液可在分離液

中分層。離心時，在 FICOLL、羥乙一基淀粉的作用下紅細胞與粒細胞聚集并迅速沉降；此時，

白細胞仍處于分離液上層及分離液層，紅細胞污染可通過紅細胞裂解液裂解紅細胞去除。大

部分血小板可在細胞清洗低速離心過程中去除。

其他人及動物多種比重細胞分離液，因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數及細胞

帶電不同，用戶在制定分離液時應提供所需分離液的比重、動物種屬及被分離細胞的名稱。

【*但不提供的儀器及耗材】

可提供 400g 離心力的水平轉子離心機、15ml 玻璃離心管、吸管等。

【注意事項】

1. 使用前，本分離液需復溫至 18-22℃。為獲得*的實驗結果，在取血后 2 小時內

進行實驗，血液提取后存放時間越長細胞活性越低。

2. 實驗過程中，如需稀釋血液或洗滌細胞，不可使用含 Ca、Mg 離子的緩沖液及培養液，其

成分會導致血細胞凝集大大降低細胞得率及純度。本公司生產的全血及組織稀釋液和細胞洗

滌液不含 Ca、Mg 離子、低內毒素水平且含細胞和保護成分，推薦使用。

3. *抗凝劑選擇：EDTA、枸櫞酸、肝素，其他抗凝劑也可使用，但會影響細胞活性。應

注意在血液稀釋過程中去除抗凝劑體積。

4. 當血液樣本粘度過高或血液樣本大于等于 3ml 時，*稀釋方法：將血液于 18-22℃以

250g 離心 10 分鐘，棄去血漿，補充添加全血及組織稀釋液（產品編號：2010C1119），添

加量為所棄去血漿體積的 1.5-2 倍，混勻備用。注：不當的稀釋方法會降低細胞得率及活性。

5. 實驗操作時，不可使用含粉手套、不可使用內毒素含量過高的液體，手套中的粉末顆粒

及高內毒素會激活細胞從而降低細胞得率及活性。

6. 本實驗不可使用高聚合材質（如聚苯乙烯）的塑料制品，其帶有的靜電作用將導致細胞

貼壁影響分離效果。

7. 吸取過多的白細胞層及分離液層會導致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細

胞數量增加。

8. 吸取過多的白細胞層上層溶液會導致血漿蛋白及血小板混雜。

9. 如需進行細胞計數，則需血液貯藏時間不得多于 10 小時，否則將導致細胞被激活，得率降低。

10. 為去除所混雜的血小板，可在分離液上層加上 4-20%蔗糖梯度等滲溶液進行二次離心。

11. 細胞純度可在步驟 10 后使用瑞氏染色方法確定，細胞活性可用臺盼藍處理后觀察。

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